A= εcl
gdzie:
A - absorbancja
ε - molowy współczynnik absorpcji
l - grubość warstwy absorpcyjnej [cm]
c - stężenie molowe [tex][mol/dm^3][/tex]
Przeliczamy stężenie masowe na stężenie molowe:
[tex]c_{mas} =[/tex] 5μg/ml = 5 * 0.000001 g * 1000 = 0.005 g/l
[tex]C_m= (0.005 g/l) / (100 g/mol) = 0.0005 mol/l = 0.0005 M[/tex]
Podstawiamy do wzoru na absorbancję:
[tex]A = 20000 dm^3/(mol*cm) * 0.0005 mol/dm^3 * 1 cm = 10 \\[/tex]
Absorbancja roztworu przy 254 nm wynosi 10.
[tex]T = \frac{1}{10^A} *100[/tex]% [tex]= 10^{-8}%[/tex] %
Transmitancja roztworu wynosi 0.00000001%.
Obliczamy absorbancję dla transmitancji rozpuszczalnika równej 5%.
[tex]T_R = 5% = 0.05[/tex]% = 0.05
[tex]A_r = lg1/T = 1.3[/tex]
Absorbancja całkowita roztworu wynosiłaby wtedy:
[tex]A_c = A_r + A = 10 + 1.3[/tex]
Prawa absorpcji
Promieniowanie przechodzące przez roztwór może ulegać 3 zjawiskom: absorpcji, odbiciu i rozproszeniu.
Transmitancja to stosunek promieniowania przechodzącego do natężenia padającego na próbkę.
Natężenie promieniowania zaabsorbowanego zależy od stężenia roztworu i grubości warstwy absorbującej. Matematycznie jest określona prawem Lamberta-Beera, która przyjmuje postać:
A = εcl, gdzie:
gdzie:
A - absorbancja
ε - molowy współczynnik absorpcji
l - grubość warstwy absorpcyjnej [cm]
c - stężenie molowe [tex][mol/dm^3][/tex]
Absorbancja powiązana jest z transmitancją następującą zależnością:
[tex]A = lg \frac{1}{T}[/tex]
Jeżeli badany roztwór składa się z kilku składników możemy skorzystać z prawa addytywności absorbancji, która mówi, że absorbancja roztworu równa jest absorbancji poszczególnych składników.
